凝膠成像分析系統基礎操作流程詳解
閱讀：12發布時間：2025-4-11
在生命科學研究領域，凝膠成像分析系統是解析核酸、蛋白質等生物大分子信息的關鍵工具。正確且規范的操作流程是獲取高質量成像數據的基石，下面為您詳細闡述其基礎操作步驟。
實驗前儀器準備
開啟凝膠成像分析系統電源，讓儀器預熱 15 至 20 分鐘。這段時間內，儀器內部的光源、相機等核心組件能達到穩定工作狀態，保證后續成像的穩定性與準確性。預熱期間，仔細檢查儀器外觀，確保無損壞或異常。同時，準備好實驗所需的凝膠，凝膠的制備需嚴格遵循實驗方案，以核酸凝膠為例，精準把控瓊脂糖濃度、緩沖液 pH 值以及凝膠凝固時間，這些因素直接影響核酸片段在凝膠中的分離效果。
凝膠放置與參數設置
將制備好的凝膠小心放置在樣品臺上，調整凝膠位置，使其位于相機視野正中心，且保持水平。凝膠放置的偏差或傾斜會導致成像出現變形，影響后續條帶分析。隨后，依據實驗目的與樣品類型設置成像參數。若檢測核酸，常用紫外光激發，需選擇合適的紫外光源及對應的濾光片，如檢測溴化乙錠（EB）染色的核酸，濾光片應選擇能透過 300 - 360nm 波長光的類型。同時，設置合理的曝光時間，曝光時間過短，條帶信號微弱難以識別；曝光時間過長，條帶過亮且可能產生拖尾，掩蓋關鍵細節。初次設置時，可參考儀器操作手冊建議值，再通過預實驗微調。
圖像采集與初步查看
完成參數設置后，點擊儀器操作界面的 “采集” 按鈕，系統開始捕捉凝膠圖像。采集過程中，確保周圍環境安靜，避免儀器受到震動干擾成像質量。圖像采集完成后，立即在儀器顯示屏上進行初步查看。檢查圖像整體清晰度，條帶是否清晰可辨，背景是否干凈無雜質。若圖像出現模糊、條帶不清晰或背景過亮等問題，需分析原因并重新采集。例如，背景過亮可能是濾光片選擇不當或暗箱遮光效果不佳，需及時調整。
圖像分析與數據記錄
利用凝膠成像分析系統自帶的分析軟件對采集到的圖像進行深入分析。軟件具備強大的條帶識別功能，通過設置合適的閾值，可自動定位并標記凝膠中的條帶，測量條帶的位置、寬度、灰度值等參數。科研人員依據這些參數，進行核酸片段大小測定、蛋白質表達量分析等工作。例如，通過對比不同樣本條帶的灰度值，可準確判斷蛋白質相對表達水平。分析完成后，將關鍵數據及時記錄保存，便于后續實驗結果整理與分析。
凝膠成像分析系統的基礎操作流程涵蓋儀器準備、凝膠放置、參數設置、圖像采集與分析等多個環節，每個環節都緊密相連，對實驗結果的準確性與可靠性起著決定性作用。科研人員需嚴格按照流程操作，才能充分發揮儀器效能，為科研工作提供有力數據支撐。
